1 .采样与消毒
采芽的时间一般选在冬季, 此时引起褐变的物质含量低, 采芽的成活率高。不过, 并非所有品种都可如此处理, 有些品种在冬季是不长新芽的。采样时, 选取新生假球茎（ 老球茎生长点多已停止发育, 且易污染） , 把新茎从母株的着生部位切下, 一边在流水中冲洗, 一边从外侧按顺序剥除叶片, 最后用锋利的刀将切口和脏物削掉。消毒剂可用酒精、漂白粉等。消毒时最好用有盖的瓶子, 一边消毒, 一边摇动, 减少气泡附着。消毒完后, 用无菌水冲洗材料数次, 然后按无菌操作要求取芽。取芽应选茎中间部位的大芽, 因为其成活率和生长率都比较高。取芽的方法有两种: 一种为摘出法。先将芽切下, 并将下面的切口切去少许, 然后自上轻压, 将芽压出, 如此重复1～2 次, 就可得到0 .5～1 .0 毫米的外植体（ 此法需小心、熟练, 切口切得太长会切掉生长点, 过短则挤不出） ; 另一种方法是首先连苞叶进行同样的液体培养, 之后除去苞叶, 将仅附周围组织的生长点移到固体培养基上。后一种方法的成活率、萌芽率相对较高。外植体的大小, 以脱毒为目的应为0 .2～0 .3 毫米, 以增殖为目的一般取0 .4～0 .6 毫米以上,具体应根据卡特兰的类型而定。其中, BLC 系大型卡特兰茎尖可达1 .5～2. 0 毫米, SLC 系小型卡特兰茎尖可取0 .5～2. 0 毫米。
2 .初代培养
初代培养时, 可以选用的培养基有: MS+ 0 .1 毫克/ 升萘乙酸+ 10% 椰乳+ 2% 蔗糖, 或MS+ 1 毫克/ 升6 苄基腺嘌呤+ 1. 0 毫克/ 升萘乙酸的固体培养基, 或1/ 2MS（去除甘氨酸） + 0 .1～1. 0 毫克/ 升萘乙酸+0 .1～1. 0 毫克/ 升6 苄基腺嘌呤+ 2%蔗糖。基本培养基还可选Nitsch、B5 或卡特兰专用培养基等。天然有机物的添加, 需根据具体情况经过实验确定。培养基的pH值以5 .5～6 .0 为好。
将摘出的生长点移植到液体培养基静置培养, 培养一周后更新培养液, 3 周后移至固体培养基。初代培养的温度以15～20 ℃成活率最高, 成活后25 ℃ 有利于增殖。光照多用2 000 勒连续照明。
